Een chemisch gedefinieerd, xeno- en Bloed-Free Tradition Medium onderhoudt verhoogde productie van kleine extracellulaire blaasjes Van mesenchymale stamcellen Cellen
Celtherapie is getuige van een opmerkelijke verschuiving naar celvrije behandelingen op foundation van paracriene factoren, in het bijzonder naar kleine extracellulaire blaasjes (sEV), die het functionele impact van de oudercellen nabootsen. Hoewel tal van op sEV gebaseerde toepassingen zich momenteel in vergevorderde preklinische stadia bevinden, hangt hun beloofde vertaling af van het overwinnen van de fabricagehindernissen die de grootschalige productie van gezuiverde sEV met zich meebrengt. Het kweekmedium dat met de oudercellen wordt gebruikt, speelt ongetwijfeld een sleutelrol in de secretiesnelheid en inhoud van de sEV. Een essentiële vereiste is het gebruik van een serum-, xeno- en bloedvrij medium om te voldoen aan de vereisten van regelgevende instanties voor de productie van sEV’s van klinische kwaliteit . Hier hebben we Oxium TM . geëvalueerdEXO, een regelgevend medium, met betrekking tot productiecapaciteit en behoud van de kenmerken en functionaliteit van de EV en het fenotype en de levensvatbaarheid van de oudercel.
Er is een vergelijkende studie opgezet met standaard DMEM en een commercieel verkrijgbaar kweekmedium dat speciaal is ontwikkeld voor sEV-productie . Onder vergelijkbare omstandigheden vertoonde Oxium TM EXO een drievoudige toename van de sEV-secretie, met een verrijking van deeltjes tussen 51 en 200 nm. Deze resultaten werden verkregen door directe kwantificering van het geconditioneerde medium om interferentie en variabiliteit van de isolatiemethode te vermijden en werden vergeleken met de twee kweekmedia die werden geëvalueerd. De hogere opbrengst die werd verkregen was constant met verschillende oogsttijdstippen (2, four en 6 dagen) en verschillende celbronnen, waaronder navelstreng-, menstruatiebloed-afgeleide mesenchymale stromale cellen en fibroblasten. Bovendien zijn het stamcelfenotype enlevensvatbaarheid van de oudercel bleef ongewijzigd.
Bovendien vertoonde Oxium TM EXO-sEV een vergelijkbaar expressiepatroon van de vesiculaire markers CD63, CD9 en CD81, met betrekking tot sEV afgeleid van de andere aandoeningen. De in vitro internalisatie-assays in verschillende doelceltypen en het farmacokinetische profiel van intraperitoneaal toegediende sEV in vivo gaven aan dat de hogere EV-productiesnelheid geen invloed had op de opnamekinetiek of de systemische biodistributie bij gezonde muizen. Samenvattend, het Oxium TM EXO-medium ondersteunt een efficiënte en robuuste productie van grote hoeveelheden sEV , waarbij de klassieke functionele eigenschappen van internalisatie in acceptordoelcellen en biologische distributie in vivo worden behouden, het leveren van de hoeveelheid en kwaliteit van EV’s voor de ontwikkeling van celvrije therapieën.
This gene encodes the receptor for urokinase plasminogen activator and, given its role in localizing and promoting plasmin formation, likely influences many normal and pathological processes related to cell-surface plasminogen activation and localize
Description: IP-10 shows homology to PF-4 (platelet factor-4) and belongs to the family of chemotactic cytokines known as chemokines. The receptor for IP-10 is CXCR3. IP-10 has been shown to bind to the virus-encoded viroceptor M3. The expression of IP-10 from a variety of cells, including monocytes, endothelial cells, keratinocytes, and fibroblasts, is induced by IFN-gamma and TNF-alpha. Human neutrophils produce IP-10 in response to IFN- gamma in combination with either TNF-alpha or bacterial lipopolysaccharides. IP-10 probably also plays a role in regulation of the growth of immature hematopoietic progenitor cells. It has been shown to suppress in vitro colony formation of highly enriched cells expressing the cell surface marker CD34 in the presence of SCF, GM-CSF, or SCF and EPO, but not in their absence with the exception of SCF.
Description: IP-10 shows homology to PF-4 (platelet factor-4) and belongs to the family of chemotactic cytokines known as chemokines. The receptor for IP-10 is CXCR3. IP-10 has been shown to bind to the virus-encoded viroceptor M3. The expression of IP-10 from a variety of cells, including monocytes, endothelial cells, keratinocytes, and fibroblasts, is induced by IFN-gamma and TNF-alpha. Human neutrophils produce IP-10 in response to IFN- gamma in combination with either TNF-alpha or bacterial lipopolysaccharides. IP-10 probably also plays a role in regulation of the growth of immature hematopoietic progenitor cells. It has been shown to suppress in vitro colony formation of highly enriched cells expressing the cell surface marker CD34 in the presence of SCF, GM-CSF, or SCF and EPO, but not in their absence with the exception of SCF.
Description: IP-10 shows homology to PF-4 (platelet factor-4) and belongs to the family of chemotactic cytokines known as chemokines. The receptor for IP-10 is CXCR3. IP-10 has been shown to bind to the virus-encoded viroceptor M3. The expression of IP-10 from a variety of cells, including monocytes, endothelial cells, keratinocytes, and fibroblasts, is induced by IFN-gamma and TNF-alpha. Human neutrophils produce IP-10 in response to IFN- gamma in combination with either TNF-alpha or bacterial lipopolysaccharides. IP-10 probably also plays a role in regulation of the growth of immature hematopoietic progenitor cells. It has been shown to suppress in vitro colony formation of highly enriched cells expressing the cell surface marker CD34 in the presence of SCF, GM-CSF, or SCF and EPO, but not in their absence with the exception of SCF.
Oprichting en lange termijn cultuur van de muis mamma-stam cel organoids en borsttumor organoids
Mammaire stamcellen (MaSCs) bijdragen tot borstepitheel ontwikkeling en homeostase. Ze zijn voorgesteld als cellen van oorsprong voor borstkanker. Hier beschrijven we een organoïde cultuurprotocol voor ex vivo uitbreiding van MaSC’s van muisweefsels. Deze organoïden behouden de zelfvernieuwing van klier-reconstituerende MaSC’s en kunnen worden gebruikt om tumorigenese te modelleren door patiëntrelevante kankerfactoren en mutaties te introduceren.
Vergelijkbare organoïde cultuur kan worden gebruikt voor langdurige expansie van luminale stam-/voorlopercellen van normale klieren en tumor-initiërende cellen van borsttumoren . Raadpleeg Christin et al. voor volledige particulars over het gebruik en de uitvoering van dit protocol. (2020) en Zhang et al. (2016).
Poly (amino ester) gebaseerde polymeren Gene and Drug Supply Methods en verdere toepassing richting Cell Tradition System
Verschillende synthetische polymeren op foundation van poly(amino-ester) (PAE) worden gesuggereerd als kandidaten voor gen- en medicijnafgifte vanwege hun pH-responsiviteit, wat bijdraagt aan efficiënte leveringsprestaties. PAE-gebaseerde pH-responsieve polymeren zijn meer biologisch afbreekbaar en hydrofiel dan andere soorten pH-responsieve polymeren. De functionaliteit van op PAE gebaseerde polymeren kan worden versterkt door verschillende chemische modificaties te gebruiken om de efficiëntie van gen- en medicijnafgifte te verbeteren. Bovendien worden op PAE gebaseerde polymeren op veel manieren gebruikt in het biomedische veld, zoals in transdermale toediening en stamcelkweeksystemen.
Hier worden de recente nieuwe op PAE gebaseerde polymeren die zijn ontworpen voor gen- en medicijnafgiftesystemen, samen met hun verdere toepassingen voor volwassen stamcelkweeksystemen beoordeeld. De synthetische tactieken worden overwogen en de voor- en nadelen van elk kind polymeer worden geanalyseerd, en gedetailleerde voorbeelden van de verschillende typen worden geanalyseerd.
De effecten van genotypen en media samenstelling op callogenesis, regeneratie en cel- suspensie kweken van kamille ( Matricaria chamomilla L)
Achtergrond: Kamille is een belangrijk kruid dat veel wordt gebruikt voor medicinale doeleinden. De multitherapeutische, cosmetische en voedingswaarden zijn vastgesteld door jarenlang traditioneel en wetenschappelijk gebruik en onderzoek. Een toenemend gebruik van geneeskrachtige planten vereist zowel rationeel gebruik als duurzame productie van dergelijke genetische bronnen. In vitro microvermeerdering van planten biedt unieke kansen voor duurzame productie van geneeskrachtige kruiden, hun hergroei en conservering. De huidige studie was gericht op het onderzoeken van de effecten van verschillende explantaten, combinaties van plantengroeiregulatoren (PGR’s) en mediatype op callogenese, in vitro regeneratie en celsuspensie van zes kamille-genotypen om de duurzame productie ervan te verbeteren.
Methoden: De scheut-, zijspruit- en blad-afgeleide explantaten van zes kamille-genotypen, waaronder Isfahan, Shiraz, Kazeron, Goral, Sharokashari en Presso, werden gebruikt voor directe en indirecte regeneratie. Voor indirecte regeneratie werden verschillende doses NAA en kinetine gebruikt om calli te induceren die werden gekweekt op MS-media die PGR’s bevatten voor directe en indirecte regeneratie. Later werd celsuspensie vastgesteld en werd morfologische karakterisering van met CrO 3 gekleurde cellen uitgevoerd met behulp van microscopie.
Resultaten en discussie: Onze bevindingen toonden aan dat het hoogste calluspercentage en callusvolume werden waargenomen van laterale spruiten en scheuten van genotype Isfahan op MS-medium dat 1 mg/L NAA en 1 mg/L kinetine bevat. De in vitro regeneratie bleek genotype-afhankelijk te zijn, terwijl 77% en 77,5% het hoogste proportion was voor respectievelijk indirecte en directe regeneratie. Bovendien werden het maximale aantal scheuten (twee scheuten/explantaat) en scheutlengte (2,22 cm) ook waargenomen in het Isfahan-genotype. Celsuspensiekweek vertoonde het hoogste versgewicht (18,59 g) en drooggewicht (1,707 g) met 0,75 g entmateriaal van de callus afkomstig van zijspruiten gekweekt op MS-medium. Microscopie van CrO 3 gekleurde cellen werden gedurende 27 dagen op elke 3e dag gedragen, wat in de begindagen grotere en sponsachtigere cellen onthulde in vergelijking met de laatste dagen toen het aantal cellen groter was maar de celgrootte kleiner was.
Conclusie: De callogenese, organogenese en celsuspensiecultuur van kamille kan afhankelijk zijn van het genotype. Daarom is optimalisatie van media-ingrediënten en kweekomstandigheden van het grootste belang voor het bedenken van een op weefselkweek gebaseerde conserveringsstrategie van elk kamille-genotype en de productie van secundaire metabolieten.
0.5mg/ml if reconstituted with 0.2ml sterile DI water
Description: Insulin-like growth factor 1, also known as somatomedin C or mechano growth factor is a protein that in humans is encoded by the IGF1 gene. IGF-1 is a hormone similar in molecular structure to insulin. It plays an important role in childhood growth and continues to have anabolic effects in adults. A synthetic analog of the protein, mecasermin, is used for the treatment of growth failure. IGF-1 consists of 70 amino acids in a single chain with three intramolecular disulfide bridges.
Description: RM-018 is a potent, functionally distinct tricomplex KRASG12C active-state inhibitor. RM-018 retains the ability to bind and inhibit KRASG12C/Y96D and could overcome resistance. RM-018 binds specifically to the GTP-bound, active [“RAS(ON)”] state of KRASG12C[1].
Description: RM-581, an aminosteroid derivative, has potent anticancer activity in different types of cancer, including high fatality pancreatic cancer[1]. RM-581 is a click chemistry reagent, it contains an Alkyne group and can undergo copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAc) with molecules containing Azide groups.
Description: The IGF-1 ELISA is an enzyme immunoassay for the quantitative in vitro diagnostic measurement of Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1) in serum.
Description: Insulin-like growth factor I (IGF-1) is a polypeptide endocrine hormone structurally similar to insulin and is mainly produced in the liver when stimulated by growth hormone. IGF-1 is a growth factor that stimulates the proliferation of various cell types including muscle, bone, and cartilage tissue
)
)
)
)
)
 ELISA)
)
)
)
)
)
)
, (Recombinant))
, Recombinant)
)
)
)
)
 ELISA Kit)
 ELISA Kit)
 ELISA Kit)
 ELISA Kit)
)
)
 Antibody)
)
)
)
)
 Antibody)